Partículas Lentivirales de Activación (h) Androgen Receptor: sc-400026-LAC

El AR humano codifica el receptor de andrógenos, un receptor nuclear de hormonas activado por ligando que funciona como factor de transcripción y controla genes implicados en la diferenciación sexual, la biología reproductiva y programas de crecimiento específicos de tejido. Tras la unión del andrógeno, el AR sufre una activación conformacional, se transloca al núcleo y se une al ADN en elementos de respuesta a andrógenos para regular el estado de la cromatina y la transcripción mediante el reclutamiento de correuladores. La señalización del AR se interconecta con las redes PI3K–AKT, MAPK y de regulación del ciclo celular, modulando la proliferación, la diferenciación y la homeostasis metabólica. La expresión o señalización desregulada del AR está implicada en la fisiopatología impulsada por hormonas y se estudia ampliamente como determinante molecular del estado de linaje y de la plasticidad transcripcional en tejidos sensibles a andrógenos.

Las partículas de activación lentiviral Androgen Receptor (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de AR en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Androgen Receptor (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción AR, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Androgen Receptor. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo AR y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.