Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMPKβ1 Antibody (Z14): sc-100357. Western blot analysis of AMPKβ1 expression in HeLa whole cell lysate.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMPKβ1双切口酶质粒(h): sc-402952-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- AMPKβ1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- AMPKβ1双切酶质粒（h）和AMPKβ1双切酶质粒（h2）编码针对PRKAB1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：AMPKβ1: sc-100357，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
AMPKβ1双切口酶质粒(h) | sc-402952-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AMPKβ1双切口酶质粒(h2) | sc-402952-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKAB1 编码 AMP 活化蛋白激酶（AMPK）的 β1 调控亚基。AMPK 是细胞能量状态的核心传感器，可将营养供给与代谢需求进行整合。AMPKβ1 有助于 AMPK 异源三聚体复合物的组装与稳定，并参与底物靶向及与糖原的结合，从而塑造磷酸化调控程序：抑制合成代谢通路、促进产 ATP 的分解代谢过程。通过 AMPK 信号通路，PRKAB1 在能量应激下影响 mTORC1 调控、自噬、脂肪酸氧化以及葡萄糖稳态。AMPK 通路活性异常与代谢功能紊乱以及癌症相关的生长与应激适应网络重编程有关，因此 PRKAB1 可作为研究能量依赖性信号机制的一个重要节点。
AMPKβ1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PRKAB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PRKAB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PRKAB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PRKAB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。