Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406251
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- AMID/AIFM2/FSP1 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im AMID/AIFM2/FSP1-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: AMID/AIFM2/FSP1: sc-377120
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406251 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
AIFM2, auch bekannt als AMID/FSP1, kodiert eine Flavoprotein-Oxidoreduktase, die an der Aufrechterhaltung der Redoxhomöostase sowie an mitochondrienassoziierten Signalwegen des Zelltods beteiligt ist. FSP1 fungiert an Membranen als NAD(P)H-abhängige CoQ10-Oxidoreduktase, bietet eine glutathionunabhängige Abwehr gegen Lipidperoxidation und unterdrückt den ferroptotischen Zelltod. Aufgrund seiner Verknüpfungen mit der Kontrolle reaktiver Sauerstoffspezies, der Integrität von Membranlipiden und apoptotischen/mitochondrialen Stressantworten wird AMID/AIFM2 häufig in der Forschung zu oxidativem Stress und metabolischer Anpassung untersucht. Eine fehlregulierte AIFM2/FSP1-Aktivität wurde mit Kontexten von Therapieresistenz und Tumorzellüberleben in Verbindung gebracht, was es für mechanistische Studien zu Zellschicksalsentscheidungen unter Stress relevant macht.
Das AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des AIFM2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des AIFM2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von AIFM2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die AMID/AIFM2/FSP1-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von AIFM2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der AMID/AIFM2/FSP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf AIFM2-Exone abzielen, die für die AMID/AIFM2/FSP1-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere AIFM2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des AIFM2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das AMID/AIFM2/FSP1 HDR-Plasmid (h) und AMID/AIFM2/FSP1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von AIFM2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten AIFM2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.