Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) alpha Synuclein: sc-423051-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) alpha Synuclein correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide alpha Synuclein Double Nickase (m) et le plasmide alpha Synuclein Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Snca. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: alpha Synuclein Antibody (2B2D1): sc-53955
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) alpha Synuclein | sc-423051-NIC | 20 µg | $410.00 |
Snca code l’alpha-synucléine murine, une protéine présynaptique impliquée dans le trafic des vésicules synaptiques, l’assemblage du complexe SNARE et la régulation de la libération des neurotransmetteurs. Elle s’associe aux membranes lipidiques et peut influencer la dynamique des pools vésiculaires, l’endocytose et les voies de protéostasie, notamment les systèmes ubiquitine–protéasome et autophagie–lysosome. Les perturbations de l’homéostasie de l’alpha-synucléine et son agrégation sont au cœur des mécanismes de neurodégénérescence, reliant Snca aux réponses neuronales au stress, au dysfonctionnement mitochondrial et à la signalisation inflammatoire. Snca est donc largement utilisé pour modéliser des événements moléculaires pertinents pour les synucléinopathies et pour étudier les voies neuronales et gliales qui façonnent le mauvais repliement des protéines et leur élimination.
alpha Synuclein Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Snca dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Snca. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Snca. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Snca.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.