AGRP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419045

개요

아구티 관련 신경펩타이드(AGRP)는 생쥐 Agrp 유전자에 의해 암호화되는 식욕 촉진(orexigenic) 신경펩타이드로, 주로 에너지 균형과 섭식 행동을 조절하는 궁상핵(arcuate nucleus) 뉴런에서 발현된다. AGRP는 멜라노코르틴 수용체, 특히 MC3R과 MC4R에서 내인성 길항제 또는 역작용제(inverse agonist)로 작용하여, 식욕 억제성(anorexigenic) 멜라노코르틴 신호를 상쇄함으로써 식욕, 지방량, 대사율을 조절한다. Agrp를 발현하는 뉴런은 내분비 및 영양(대사) 신호를 통합하고, 포도당 항상성과 신경내분비 출력(neuroendocrine outputs)을 조절하는 시상하부 회로와 연결된다. AGRP 연관 경로의 조절 이상은 비만, 대사증후군, 당뇨병 관련 표현형, 그리고 스트레스와 연관된 섭식 행동 변화 모델에서 빈번히 연구된다.

AGRP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Agrp 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Agrp 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Agrp의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 AGRP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 AGRP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Agrp 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• AGRP 기능에 중요한 Agrp 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Agrp 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• AGRP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 AGRP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Agrp 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  AGRP HDR 플라스미드 (m) 및 AGRP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Agrp 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Agrp 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.