Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403213

Visão geral

ADCY7 codifica a adenilato ciclase 7 (AC7), uma enzima associada à membrana que converte ATP em AMP cíclico (cAMP), um segundo mensageiro que controla a sinalização de proteína quinase A (PKA) e EPAC, programas de transcrição e a regulação por retroalimentação de respostas imunes e inflamatórias. A AC7 atua a jusante de receptores acoplados à proteína G (GPCR) via Gαs e é modulada por Gβγ e outras entradas regulatórias, moldando dinâmicas de cAMP específicas do estímulo. Em células humanas, a sinalização de cAMP dependente de ADCY7 influencia a produção de citocinas, a ativação de leucócitos e respostas ao estresse celular, ligando esse ponto nodal a vias relevantes para inflamação e defesa do hospedeiro. Variações genéticas ou regulação alterada de enzimas geradoras de cAMP têm sido associadas à suscetibilidade a fenótipos inflamatórios e metabólicos, sustentando estudos mecanísticos de AC7 em contextos celulares relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADCY7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADCY7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADCY7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADCY7 para a investigação da sinalização de Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADCY7 críticos para a função Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADCY7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADCY7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Adenylate cyclase 7/AC7/ADCY7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADCY7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADCY7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.