Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400407-KO-2

Visão geral

ADCY3 codifica a adenilato ciclase 3 (AC3), uma enzima associada à membrana que converte ATP em AMP cíclico (cAMP), moldando assim a sinalização por segundos mensageiros a jusante de diversos receptores acoplados à proteína G (GPCRs). Ao regular os níveis intracelulares de cAMP, a AC3 influencia vias dependentes de PKA e EPAC que controlam programas de transcrição, a atividade de canais iônicos e respostas metabólicas celulares. A AC3 é amplamente estudada em contextos sensoriais e neuroendócrinos e contribui para a sinalização em microdomínios de cAMP que ajusta o acoplamento estímulo–resposta. Evidências genéticas e funcionais associam a sinalização ligada ao ADCY3 a fenótipos metabólicos e traços neurocomportamentais, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da regulação mediada por cAMP em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADCY3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADCY3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADCY3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADCY3 para a investigação da sinalização de Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADCY3 críticos para a função Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADCY3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADCY3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADCY3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADCY3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.