ADAMTS-16 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406511

Descripción general

ADAMTS16 codifica ADAMTS-16, una metaloproteinasa secretada dependiente de zinc de la familia ADAMTS que remodela proteolíticamente componentes de la matriz extracelular (MEC) y regula la arquitectura tisular. Al modular la actividad proteasa en el espacio pericelular, ADAMTS-16 influye en el recambio de la MEC, la señalización célula–matriz y las señales del microambiente que afectan a programas de adhesión, migración y diferenciación. La alteración de la expresión o la actividad de ADAMTS16 se ha investigado en contextos en los que la remodelación de la matriz está desregulada, como la fisiología cardiovascular y renal, la biología reproductiva y la remodelación del estroma asociada a tumores. Como proteasa asociada a la matriz, ADAMTS-16 se estudia comúnmente junto con vías relacionadas con la organización de la MEC, la proteólisis y la señalización celular en la interfaz tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-16 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADAMTS16 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADAMTS16 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADAMTS16 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAMTS-16.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADAMTS16 para la investigación de la señalización de ADAMTS-16, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADAMTS16 críticos para la función de ADAMTS-16
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADAMTS16 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADAMTS16. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAMTS-16 (h) y el plásmido HDR ADAMTS-16 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADAMTS16 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADAMTS16 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.