Plasmide CRISPR/Cas9 KO ACTR6 (m): sc-426328

Présentation

Actr6 code la protéine 6 apparentée à l’actine (ACTR6), un facteur nucléaire apparenté à l’actine qui agit au sein de complexes de régulation de la chromatine afin de favoriser le remodelage des nucléosomes et le contrôle transcriptionnel. L’activité d’ACTR6 contribue à l’organisation de l’architecture des promoteurs et des enhancers et influence l’accessibilité de l’ADN lors de processus tels que les réponses au stress de réplication et la réparation des dommages à l’ADN. En modulant la dynamique de la chromatine, Actr6 peut influencer la progression du cycle cellulaire, la spécification de lignage et les programmes de stabilité du génome. Le dérèglement du remodelage de la chromatine est largement impliqué dans des anomalies du développement et des états transcriptionnels oncogènes, faisant d’Actr6 un nœud d’intérêt pour l’étude de mécanismes épigénétiques pertinents pour les maladies.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ACTR6 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Actr6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Actr6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Actr6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ACTR6.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Actr6 pour l'étude de la signalisation de ACTR6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Actr6 essentiels à la fonction de ACTR6
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Actr6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le ACTR6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ACTR6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Actr6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le ACTR6 plasmide HDR (m) et le ACTR6 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Actr6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Actr6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.