
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
acrogranin CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-401924-ACT | 20 µg | $397.00 |
GRN은 세포외 환경에서 염증 신호전달과 프로테아제 활성을 조절함으로써 세포 성장, 생존, 조직 재형성을 지원하는 분비성 당단백질인 아크로그라닌(프로그라뉼린)을 암호화합니다. 아크로그라닌은 리소좀 항상성과 엔도좀 수송에 영향을 미치며, 과립린(granulin)으로 절단되면 사이토카인 반응과 세포 스트레스 프로그램을 재편할 수 있습니다. 신경계에서는 미세아교세포 기능, 시냅스 유지, 뉴런의 회복탄력성에 기여하고, 말초 조직에서는 상처 치유와 기질–상피 상호작용에 영향을 줍니다. GRN 발현의 이상 조절 또는 반수체불충분(haploinsufficiency)은 신경퇴행과 면역 기능 이상과 연관되며, 변화된 프로그라뉼린 신호는 증식과 염증을 조절하는 인자로서 암 및 섬유화 생물학에서도 연구되고 있습니다.
acrogranin CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 GRN 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
acrogranin CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 GRN 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 GRN 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 acrogranin 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 GRN 위치를 보존하고 내인성 위치에서 acrogranin 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 GRN 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 acrogranin 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.