3β-HSD6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420970
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- 3β-HSD6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico 3β-HSD6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
3β-HSD6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420970 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Hsd3b6** codifica la **3β-HSD6**, una hidroxiesteroide deshidrogenasa que cataliza pasos redox clave en la biosíntesis de hormonas esteroideas al interconvertir **3β-hidroxiesteroides** y **3-cetoesteroides**. Esta actividad sostiene el flujo esteroidogénico y contribuye a mantener la homeostasis esteroidea celular, lo que afecta la señalización posterior de receptores nucleares y programas transcripcionales más amplios regulados por el sistema endocrino. La alteración de la función de la familia 3β-HSD puede modificar los reservorios de precursores de andrógenos, estrógenos y corticosteroides, vinculando este nodo enzimático con estudios de biología reproductiva, fisiología suprarrenal/gonadal y regulación metabólica. Por lo tanto, **Hsd3b6** es relevante para analizar cómo las enzimas esteroidogénicas moldean redes de señalización y fenotipos específicos de tejido en sistemas de modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO 3β-HSD6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hsd3b6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hsd3b6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hsd3b6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína 3β-HSD6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hsd3b6 para la investigación de la señalización de 3β-HSD6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Hsd3b6 críticos para la función de 3β-HSD6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hsd3b6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido 3β-HSD6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido 3β-HSD6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hsd3b6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR 3β-HSD6 (m) y el plásmido HDR 3β-HSD6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hsd3b6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hsd3b6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.