Plasmide Double Nickase (h) β-defensin 3: sc-416934-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) β-defensin 3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide β-defensin 3 Double Nickase (h) et le plasmide β-defensin 3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DEFB103B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: β-defensin 3 Antibody (L3-18b-E1): sc-59495
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) β-defensin 3 | sc-416934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) β-defensin 3 | sc-416934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DEFB103B** code la **β‑défensine 3**, un peptide antimicrobien cationique qui contribue à l’immunité de la barrière épithéliale en perturbant directement les membranes microbiennes et en modulant la signalisation de l’immunité innée. La β‑défensine 3 est induite par des signaux inflammatoires et participe à des processus chimiotactiques et immunorégulateurs qui façonnent le recrutement des leucocytes et l’homéostasie des muqueuses, avec des liens avec des programmes de défense de l’hôte associés à **NF‑κB**. Une expression altérée des défensines a été associée à une susceptibilité à l’inflammation cutanée et des voies aériennes, à des phénotypes liés à la dysbiose et à un risque accru d’infection, faisant de **DEFB103B** un locus pertinent pour étudier la régulation des peptides antimicrobiens dans des contextes épithéliaux pertinents pour la maladie.
β-defensin 3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DEFB103B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DEFB103B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DEFB103B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DEFB103B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.