β1-Adaptin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402948

개요

AP1B1은 트랜스-골지 네트워크와 엔도좀에서 화물(cargo) 인식과 클라트린 매개 소낭 형성을 연결하는 어댑터 단백질 복합체 1(AP-1)의 β 소단위인 β1-어댑틴(β1-Adaptin)을 암호화합니다. AP-1은 막관통 단백질의 소팅 모티프에 결합하고 소형 GTPase 및 보조 인자들과 협력함으로써, 막 조성과 신호전달 항상성을 유지하는 데 필요한 극성 수송(polarized trafficking), 엔도좀 재활용, 그리고 리소좀 표적 수송을 조절합니다. AP1B1-의존적 소팅이 교란되면 상피 세포의 극성이 흐트러지고, 수용체 분포, 영양분 수송체의 국소화, 그리고 세포 스트레스 반응과 연관된 단백질 항상성(proteostasis) 경로가 변화할 수 있습니다. AP1B1의 유전적 변이는 신경발달 및 수송 이상과 관련된 표현형과 연관된 바 있어, 소낭 수송 기능 장애의 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

β1-Adaptin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 AP1B1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 AP1B1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 AP1B1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 β1-Adaptin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 β1-Adaptin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 AP1B1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• β1-Adaptin 기능에 중요한 AP1B1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 AP1B1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• β1-Adaptin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 β1-Adaptin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 AP1B1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  β1-Adaptin HDR 플라스미드 (h) 및 β1-Adaptin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 AP1B1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 AP1B1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.