非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
αENaC 抗体 (H-6)：sc-518119。NIH/3T3 全细胞裂解液中 αENaC 表达的 Western 印迹分析。所用检测试剂：m-IgGκ BP-HRP：sc-516102。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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αENaC CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422825
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- αENaC CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在αENaC基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
αENaC CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422825 | 20 µg | $397.00 |
概述
Scnn1a 编码上皮钠通道（ENaC）的α亚基（αENaC），它是气道、肾脏及其他上皮组织顶端膜上对阿米洛利（amiloride）敏感的 Na⁺ 吸收过程中的限速关键组分。αENaC 与 β、γ 亚基组装，共同调控跨上皮钠转运，从而影响气道表面液体稳态以及肾脏钠平衡。该通道活性受蛋白水解激活与依赖泛素的周转所调控，其中以 Nedd4-2 介导的内吞作用及调节钠处理的激素信号尤为重要。ENaC 依赖的离子转运失衡常被用作小鼠模型中研究上皮液体失衡、黏液脱水以及盐敏感性生理机制的框架。
αENaC CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Scnn1a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Scnn1a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Scnn1a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使αENaC蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Scnn1a缺失的细胞模型，用于αENaC信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 αENaC 功能至关重要的 Scnn1a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Scnn1a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 αENaC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 αENaC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Scnn1a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 αENaC HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 αENaC HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Scnn1a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Scnn1a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。