Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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WDR33 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409284-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WDR33O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WDR33 (h) e o Plasmídeo Double Nickase WDR33 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WDR33. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:WDR33 Anticorpo (D-1): sc-374466
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WDR33 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409284-NIC | 20 µg | $410.00 |
O WDR33 humano codifica um componente central do complexo fator de especificidade de clivagem e poliadenilação (CPSF), que medeia o processamento da extremidade 3′ de pré-mRNAs. O WDR33 participa do reconhecimento do sinal canônico de poliadenilação AAUAAA e ajuda a coordenar a clivagem endonucleolítica com a adição da cauda poli(A), moldando a estabilidade do transcrito, a exportação nuclear e a tradução. Por meio de seu papel na poliadenilação alternativa, o WDR33 influencia programas globais de expressão gênica e pode afetar a proliferação celular, a diferenciação e as respostas ao estresse. A desregulação do processamento da extremidade 3′ e de componentes da via de poliadenilação, incluindo o WDR33, é relevante para estudos sobre o uso aberrante de isoformas de mRNA e alterações de expressão gênica observadas em diversos modelos de doença.
WDR33 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WDR33 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WDR33. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WDR33. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WDR33 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.