Plasmide Double Nickase (h) Sox9: sc-400143-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sox9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sox9 Double Nickase (h) et le plasmide Sox9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SOX9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sox9 Antibody (E-9): sc-166505
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sox9 | sc-400143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sox9 | sc-400143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX9 code le facteur de transcription Sox9, une protéine de liaison à l’ADN de type « high-mobility group » (HMG), qui régule la spécification des lignages et les programmes de différenciation dans de nombreux tissus. Au cours du développement et dans l’homéostasie adulte, Sox9 intègre des signaux tels que TGF-β/BMP, WNT/β-caténine, Hedgehog et Notch afin de contrôler des réseaux de gènes impliqués dans la chondrogenèse, le maintien des cellules souches/progénitrices et les décisions de destin des cellules épithéliales. L’activité de SOX9 influence la production de matrice extracellulaire et la dynamique du cycle cellulaire par le contrôle transcriptionnel direct de loci cibles et grâce à sa coopération avec des facteurs de transcription partenaires. Une expression ou une fonction dérégulée de SOX9 a été associée à des maladies squelettiques congénitales et contribue à des états pathologiques impliquant une différenciation aberrante et des programmes transcriptionnels oncogéniques, ce qui en fait une cible largement utilisée pour les études mécanistiques du développement et de la biologie des maladies.
Sox9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SOX9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SOX9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SOX9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SOX9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.