PSGL-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422874

개요

Selplg는 P-셀렉틴 당단백질 리간드-1(PSGL-1)을 암호화합니다. PSGL-1은 백혈구에 발현되는 뮤신 유사 시알로뮤신으로, 셀렉틴과 결합하여 활성화된 혈관 내피와 혈소판에서의 부착(tethering), 구름(rolling), 그리고 강한 부착(firm adhesion)을 매개합니다. 조절된 당화(glycosylation)와 티로신 황산화(tyrosine sulfation)를 통해 PSGL-1은 부착 및 케모카인 유도 신호전달과 통합되어 백혈구 이동, 혈관 밖 유출(extravasation), 면역 시냅스 형성을 조정합니다. PSGL-1은 호중구 유입, 단핵구–내피 상호작용, 혈소판–백혈구 응집체 형성에 영향을 주어 염증성 연쇄반응에 관여하며, 혈관 염증과 면역 활성화를 연결합니다. SELPLG/PSGL-1 기능의 조절 이상은 숙주 방어 변화와 염증성 병리와의 연관성이 보고되어, 백혈구 이동과 면역혈전증(immunothrombosis) 관련 과정의 기전 연구에 유용한 표적으로 여겨집니다.

PSGL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Selplg 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Selplg 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Selplg의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PSGL-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PSGL-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Selplg 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PSGL-1 기능에 중요한 Selplg 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Selplg 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PSGL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PSGL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Selplg 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PSGL-1 HDR 플라스미드 (m) 및 PSGL-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Selplg 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Selplg 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.