P-Selectin/CD62P/SELP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400441

개요

SELP는 P-셀렉틴(CD62P)을 암호화하며, 이는 혈소판 α-과립과 내피세포의 Weibel–Palade 소체에 저장되어 있다가 염증성 또는 혈전성 자극을 받으면 빠르게 세포 표면에 발현되는 유도성 부착 수용체이다. 세포 표면의 P-셀렉틴은 백혈구의 PSGL-1에 결합하여 활성화된 내피에서의 테더링(tethering)과 롤링(rolling), 그리고 혈소판–백혈구 상호작용을 매개하며, 부착 역학을 백혈구 유입과 혈관 염증을 지지하는 하위 신호전달과 연결한다. 이 축은 셀렉틴 매개 부착 연쇄 반응, 혈소판 활성화, 그리고 응고와 연관된 염증 경로와 교차하며, 내피 활성화와 면역세포 이동을 형성한다. SELP의 발현 또는 활성이 비정상적으로 조절되는 경우는 혈전증, 죽상동맥경화증, 허혈–재관류 손상, 염증성 질환 모델에서 자주 연구되는데, 이들에서는 혈소판–내피–백혈구 간 크로스토크가 병태생리에 기여한다.

P-Selectin/CD62P/SELP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SELP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SELP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SELP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P-Selectin/CD62P/SELP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P-Selectin/CD62P/SELP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SELP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P-Selectin/CD62P/SELP 기능에 중요한 SELP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SELP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P-Selectin/CD62P/SELP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 P-Selectin/CD62P/SELP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SELP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P-Selectin/CD62P/SELP HDR 플라스미드 (h) 및 P-Selectin/CD62P/SELP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SELP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SELP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.