
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Jagged1 CRISPR 활성화 플라스미드(m) | sc-421197-ACT | 20 µg | $397.00 |
마우스 Jag1 유전자는 NOTCH 수용체의 대표적인 막결합 리간드인 Jagged1을 암호화하며, 배아 발생과 성체 조직 항상성 동안 접촉 의존적(juxtacrine) 신호전달을 조절한다. Jagged1–NOTCH 결합은 수용체의 단백질분해적 활성화와 HES/HEY 인자를 포함하는 하위 전사 프로그램을 조절하여, 여러 계통에서 세포 운명 결정, 경계 형성, 분화 선택에 영향을 준다. 마우스에서 Jag1은 혈관 재형성, 신경발생, 면역세포 상호작용에 기여하며, 그 조절 이상은 발생 이상과 종양성 또는 섬유화 신호전달 맥락에서 Notch 경로 활성 변화의 모델로 널리 활용된다. Jagged1은 세포 표면에서 기능하기 때문에 리간드–수용체 동역학, 엔도사이토시스 의존적 Notch 활성화, 니치(niche) 매개 전구세포 상태 조절 연구에도 관련성이 높다.
Jagged1 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 Jag1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
Jagged1 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 인간 세포주에서 Jag1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 Jag1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 Jagged1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 Jag1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 Jagged1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 Jag1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 Jagged1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.