GFRα-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405061

개요

GFRA3는 인간 교세포주 유래 신경영양인자(GDNF) 계열 수용체 알파-3(GFRα-3)를 암호화하며, 이는 GPI로 세포막에 고정된 보조수용체로서 신경영양인자 아르테민(artemin) 및 관련 GDNF 계열 리간드에 대한 리간드 특이성을 부여합니다. 리간드가 결합하면 GFRα-3는 RET 수용체 티로신 키나아제와 협력하여 MAPK/ERK 및 PI3K/AKT를 포함한 신호전달 연쇄반응을 개시하고, 이를 통해 신경세포의 생존, 분화, 축삭 유도(axonal guidance)를 조절합니다. GFRA3는 말초신경계 발달과 신경-면역 상호작용에서 폭넓게 연구되어 왔으며, 수용체-리간드 신호의 변화가 감각신경 기능과 염증성 통증 처리와 관련된 기전과 연관되는 것으로 보고되었습니다. 또한 GFRA3가 관여하는 RET/GDNF 계열 신호의 조절 이상은 일부 암 모델에서 종양세포 신호전달, 침윤, 그리고 미세환경과의 상호 소통(crosstalk) 맥락에서도 연구되고 있습니다.

GFRα-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GFRA3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GFRA3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GFRA3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GFRα-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GFRα-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GFRA3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GFRα-3 기능에 중요한 GFRA3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GFRA3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GFRα-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GFRα-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GFRA3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GFRα-3 HDR 플라스미드 (h) 및 GFRα-3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GFRA3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GFRA3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.