FOXM1 Plasmide Double Nickase (h): sc-416676-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FOXM1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FOXM1 Double Nickase Plasmid (h) e il FOXM1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FOXM1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FOXM1 Antibody (G-5): sc-376471
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FOXM1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416676-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FOXM1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416676-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXM1 è un fattore di trascrizione della famiglia forkhead box che coordina la progressione del ciclo cellulare regolando i geni necessari per la transizione G1/S, la replicazione del DNA e l’ingresso mitotico G2/M. Integra segnali provenienti da vie quali l’asse CDK–RB/E2F e le reti mitotiche associate a PLK1 e alle chinasi Aurora, per mantenere la competenza proliferativa e la stabilità genomica. FOXM1 modula inoltre le risposte al danno al DNA e i programmi di stress ossidativo, collegando il controllo dei checkpoint alla tolleranza dello stress replicativo. L’espressione e l’attività deregolate di FOXM1 sono spesso associate a proliferazione incontrollata, instabilità cromosomica e alterazioni della biologia delle cellule tumorali, rendendolo un nodo ampiamente studiato nella ricerca sul cancro e sul ciclo cellulare.
FOXM1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FOXM1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FOXM1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FOXM1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FOXM1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.