EY-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401988

Visão geral

CDH18 codifica a EY-caderina humana, um membro clássico da família das caderinas que sustenta a adesão célula–célula dependente de Ca²⁺ e contribui para a arquitetura dos tecidos ao acoplar as junções aderentes ao citoesqueleto de actina por meio de complexos de cateninas. Ao regular a coesão intercelular, a polaridade e a sinalização dependente de contato, o CDH18 pode influenciar processos ligados à organização epitelial e neuronal, incluindo migração e formação de fronteiras. Alterações na expressão de caderinas e na integridade das junções são frequentemente associadas à diferenciação desregulada e ao comportamento invasivo em modelos relevantes de doença, tornando o CDH18 um ponto útil para o estudo de fenótipos impulsionados por adesão. Padrões de expressão do CDH18 e perturbações genéticas ou epigenéticas têm sido investigados em contextos em que a identidade e a conectividade celulares estão comprometidas, incluindo câncer e transtornos do neurodesenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EY-cadherin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDH18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDH18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDH18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EY-cadherin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDH18 para a investigação da sinalização de EY-cadherin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDH18 críticos para a função EY-cadherin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDH18 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo EY-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EY-cadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDH18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo EY-cadherin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EY-cadherin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDH18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDH18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.