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Estrogen Receptor alpha双切口酶质粒(h) | sc-400011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Estrogen Receptor alpha双切口酶质粒(h2) | sc-400011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESR1 编码雌激素受体α(ERα),这是一种配体激活的核受体,可作为转录因子协调雌激素响应性基因程序。激素结合后,ERα 与雌激素反应元件以及共调控因子复合体结合,从而调控染色质可及性与转录,并整合 PI3K/AKT、MAPK/ERK 及细胞周期调控网络等信号通路。ERα 的活性在多种组织中影响细胞增殖、分化与代谢稳态;而 ESR1 的调控异常或变体形式常被用于研究激素响应性肿瘤生物学与内分泌信号失调。由于 ERα 依赖的转录与表观遗传调控及受体间串话相互交织,ESR1 是解析类固醇受体信号传导与转录网络架构的重要核心靶点。
Estrogen Receptor alpha 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ESR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ESR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ESR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ESR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。