Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Espin (h): sc-403106
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Espin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Espin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Espin Antibody (E-7): sc-393469
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Espin (h) | sc-403106 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ESPN code l’espine, une protéine de regroupement des filaments d’actine qui se localise dans des faisceaux parallèles de filaments d’actine et est particulièrement abondante dans les microvillosités et les stéréocils. L’espine régule l’architecture du cytosquelette, notamment l’allongement et la stabilisation des protrusions, contribuant ainsi à façonner la morphologie de la surface cellulaire et les structures mécanosensorielles. En modulant la dynamique de l’actine et sa réticulation, l’espine influence des processus tels que l’organisation de la bordure en brosse épithéliale et le maintien des stéréocils des cellules ciliées. Une altération de la fonction d’ESPN a été associée à des phénotypes sensoriels et cytosquelettiques pertinents pour la biologie de l’audition et des troubles structuraux liés à l’actine.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Espin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ESPN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ESPN, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ESPN à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Espin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ESPN pour l'étude de la signalisation de Espin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ESPN essentiels à la fonction de Espin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ESPN pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Espin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Espin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ESPN. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Espin plasmide HDR (h) et le Espin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ESPN pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ESPN définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.