DSCD75 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412188-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DSCD75O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DSCD75 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DSCD75 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para THEM6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DSCD75 Anticorpo (A-8): sc-374256
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DSCD75 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412188-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DSCD75 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412188-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano THEM6 codifica a DSCD75, uma proteína transmembranar associada ao retículo endoplasmático, implicada em processos do metabolismo lipídico e na manutenção da homeostase de membrana. A THEM6 tem sido associada à regulação do manuseio de ácidos graxos e da função do RE, conectando-se a vias que coordenam a biossíntese de lipídios, a composição das membranas de organelas e respostas celulares ao estresse. A perturbação desses processos é relevante para fenótipos envolvendo sinalização lipídica alterada e adaptação metabólica, frequentemente estudados em estados celulares proliferativos e sob condições de estresse. Como resultado, a DSCD75 é comumente investigada no contexto do remodelamento da rede RE–lipídios e de efeitos subsequentes sobre a fisiologia celular.
DSCD75 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus THEM6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de THEM6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função THEM6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com THEM6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.