ACTC1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418966

개요

Actc1는 알파 심장 액틴(ACTC1)을 암호화하며, 이는 횡문근에서 힘 생성에 기여하는 근절(sarcomere) 얇은 필라멘트(thin filament)의 핵심 구성 요소로서 F-액틴으로 중합됩니다. ACTC1은 미오신, 트로포미오신, 그리고 트로포닌 복합체와 함께 작용해 Ca2+ 의존적 수축을 조절하며, 근원섬유(myofibril) 조립, 근절 조직화, 세포골격 기계신호전달(mechanotransduction)에 기여합니다. 마우스에서 Actc1는 심장 및 골격근의 발달과 리모델링과 밀접하게 관련되어 있으며, 액틴 필라멘트 동역학을 수축성, 세포 구조, 스트레스 반응을 조절하는 경로들과 연결합니다. ACTC1의 유전적·기능적 교란은 심근병증 관련 표현형 및 비정상적인 근육 기능과 연관되어 있어, 근절 무결성과 심장 생리에서 질환 관련 변화를 연구하는 데 유용한 표적입니다.

ACTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Actc1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actc1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actc1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ACTC1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ACTC1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actc1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ACTC1 기능에 중요한 Actc1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actc1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ACTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ACTC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actc1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ACTC1 HDR 플라스미드 (m) 및 ACTC1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actc1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actc1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.