ACTA1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418964

개요

Acta1은 골격근에서 가장 우세한 근절성 α-액틴(α-actin) 동형(isoform)인 ACTA1을 암호화하며, 이 단백질은 중합되어 Z-원반(Z-disc)에 고정되는 얇은 필라멘트를 형성하고 액토미오신 기반 수축을 가능하게 합니다. ACTA1은 구조적 세포골격 조직화와 칼슘 조절 수축 신호를 통합하여 근원섬유 형성(myofibrillogenesis), 근절 유지, 그리고 기계적 힘 전달을 뒷받침합니다. ACTA1 기능이 변하면 근섬유의 무결성과 수축성이 교란되며 선천성 근병증과 연관되어, in vivo 및 in vitro에서 근절 조립 결함과 근육 퇴행 기전을 연구하는 데 중심적 노드가 됩니다. 마우스 시스템에서 Acta1은 골격근 분화, 섬유형 재구성, 그리고 기계적 부하에 대한 스트레스 반응의 핵심 표지자이자 기능적 결정인자로 작용합니다.

ACTA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acta1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acta1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acta1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ACTA1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ACTA1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acta1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ACTA1 기능에 중요한 Acta1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acta1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ACTA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ACTA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acta1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ACTA1 HDR 플라스미드 (m) 및 ACTA1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acta1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acta1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.