ZnT-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403451

Descripción general

SLC30A10 codifica ZnT-10, un miembro de la familia SLC30 de transportadores de metales que regula la homeostasis intracelular de cationes divalentes, con un papel clave en el eflujo y la compartimentación del manganeso. Al controlar los niveles celulares de manganeso, ZnT-10 influye en la función de las metaloproteínas, en las respuestas al estrés oxidativo y en procesos de señalización aguas abajo que son sensibles a la actividad enzimática dependiente de metales. La desregulación de SLC30A10 se asocia con una acumulación anómala de manganeso y un manejo alterado de metales que puede perturbar la fisiología hepática y neurológica. Como resultado, ZnT-10 se estudia en vías que conectan el transporte de metales, la función mitocondrial y la adaptación al estrés celular en modelos celulares humanos relevantes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZnT-10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC30A10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC30A10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC30A10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZnT-10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC30A10 para la investigación de la señalización de ZnT-10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC30A10 críticos para la función de ZnT-10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC30A10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZnT-10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZnT-10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC30A10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZnT-10 (h) y el plásmido HDR ZnT-10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC30A10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC30A10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.