ZIP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406811

概要

SLC39A10は、SLC39/ZIPファミリーに属する血漿膜の亜鉛取り込みトランスポーターであるZIP10をコードしており、金属酵素活性、亜鉛フィンガー型転写因子、酸化還元感受性シグナル伝達に必要な細胞質内Zn2+の利用可能量を調節します。亜鉛恒常性を制御することで、ZIP10は細胞増殖・分化・ストレス応答に関連する経路に影響を及ぼし、亜鉛依存的なキナーゼおよびホスファターゼ活性の調節によって形成されるシグナル伝達カスケードにも関与します。ZIP10の発現変化や亜鉛の取り扱いの異常は、免疫細胞機能、上皮生物学、腫瘍関連の表現型と関連することが文献で報告されており、細胞プログラムが亜鉛の利用可能性に広く依存していることを反映しています。これらの特性により、SLC39A10は亜鉛制御シグナル伝達ネットワークや金属イオン輸送の生物学に関する機構研究の有用な標的となります。

ZIP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC39A10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC39A10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC39A10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZIP10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZIP10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC39A10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZIP10の機能に不可欠なSLC39A10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC39A10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZIP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZIP10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC39A10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZIP10 HDRプラスミド（h）および ZIP10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC39A10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC39A10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。