von Willebrand Factor/VWF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400217

개요

VWF는 주로 혈관내피세포와 거핵세포에서 합성되며, Weibel–Palade 소체와 혈소판 α-과립에 저장되는 큰 다중량체(multimer) 당단백질인 폰 빌레브란트 인자(von Willebrand factor)를 암호화합니다. VWF는 높은 전단응력(high shear stress) 하에서 노출된 내피하 콜라겐에 대한 혈소판의 포획(tethering)과 부착(adhesion)을 매개하고, 순환 중 응고인자 VIII를 안정화하여 1차 지혈과 응고 연쇄반응을 연결합니다. 또한 조절된 분비와 ADAMTS13에 의한 다중량체 가공은 혈전 형성의 동역학과 혈관 항상성에 영향을 줍니다. VWF의 양, 다중량체 구성, 또는 제거(clearance)의 조절 이상은 유전성 및 후천성 출혈·혈전성 표현형과 연관되어 있어, 내피 생물학과 지혈 균형을 연구하는 데 핵심적인 표적(노드)입니다.

von Willebrand Factor/VWF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 VWF 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 VWF 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 VWF의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 von Willebrand Factor/VWF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 von Willebrand Factor/VWF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 VWF 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• von Willebrand Factor/VWF 기능에 중요한 VWF 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 VWF 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• von Willebrand Factor/VWF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 von Willebrand Factor/VWF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 VWF 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  von Willebrand Factor/VWF HDR 플라스미드 (h) 및 von Willebrand Factor/VWF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 VWF 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 VWF 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.