Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ValRS (m): sc-423653
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ValRS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ValRS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ValRS Antibody (D-7): sc-166674
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ValRS (m) | sc-423653 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Vars code la valyl‑ARNt synthétase (ValRS), une aminoacyl‑ARNt synthétase cytosolique qui ligature la valine à son ARNt cognat, garantissant la fidélité de la traduction et l’homéostasie du protéome. En maintenant un décodage précis lors de la synthèse protéique, ValRS soutient des processus fondamentaux, notamment la fonction ribosomique, les réponses intégrées au stress liées à un déséquilibre en acides aminés, ainsi que des réseaux plus larges de protéostasie. Une perturbation du chargement des ARNt en aminoacides peut altérer la croissance cellulaire et l’adaptation au stress, reliant cette voie à des mécanismes pertinents pour le neurodéveloppement, la biologie neuromusculaire et la coordination mitochondrie–cytosol via une modification de la demande protéomique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ValRS (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Vars dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Vars, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Vars à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ValRS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Vars pour l'étude de la signalisation de ValRS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Vars essentiels à la fonction de ValRS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Vars pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ValRS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ValRS plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Vars. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ValRS plasmide HDR (m) et le ValRS (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Vars pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Vars définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.