TRPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423513

Visão geral

Trpc2 codifica a TRPC2, um membro da família de canais catiônicos TRPC (transient receptor potential canonical) que regula o influxo de Ca2+ operado por receptor a jusante da sinalização da fosfolipase C. Em camundongos, a TRPC2 está fortemente ligada à transdução de sinais sensoriais no sistema vomeronasal, onde a entrada de cálcio molda a excitabilidade neuronal e vias a jusante dependentes de MAPK/CaM que influenciam programas de genes de resposta imediata. Por meio desses processos dependentes de cálcio, Trpc2 contribui para comportamentos evocados por feromônios e para o acoplamento neuroendócrino, tornando-se relevante para estudos de quimiossensação, função de circuitos neurais e fenótipos associados ao comportamento. A desativação de Trpc2 é comumente usada para investigar como a dinâmica de cálcio mediada por canais TRP coordena o processamento sensorial e as respostas do organismo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRPC2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trpc2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trpc2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trpc2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRPC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trpc2 para a investigação da sinalização de TRPC2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trpc2 críticos para a função TRPC2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trpc2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TRPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TRPC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trpc2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TRPC2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TRPC2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trpc2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trpc2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.