tropomodulin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405617

概要

TMOD3は、アクチンフィラメントのマイナス端（pointed end）をキャップしてフィラメントの長さと安定性を制御するタンパク質であるトロポモジュリン3をコードしており、皮質アクチンの組織化、細胞形態、ならびに力学的特性を支えます。アクチン動態を調節することで、TMOD3は細胞移動、接着、細胞質分裂といった細胞骨格リモデリング過程に寄与し、膜輸送やアクトミオシン収縮性を制御する経路とも機能的に連関します。アクチン制御の破綻は、がん細胞の浸潤や血液系細胞の機能障害など、細胞骨格の組織化が乱れる多様な疾患状況で関与が示唆されており、TMOD3は細胞骨格依存性の表現型を研究する上で有用なノードとなります。TMOD3はまた、正常な細胞機能に精密なアクチンフィラメント制御が必要な赤血球系細胞および免疫細胞の構築を調べる際にも関連します。

tropomodulin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMOD3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMOD3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMOD3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、tropomodulin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、tropomodulin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMOD3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• tropomodulin 3の機能に不可欠なTMOD3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMOD3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• tropomodulin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびtropomodulin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMOD3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  tropomodulin 3 HDRプラスミド（h）および tropomodulin 3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMOD3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMOD3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。