TFPI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423362

概要

Tfpi2 は、組織因子経路インヒビター2（TFPI-2）をコードしています。TFPI-2 は分泌型の Kunitz 型セリンプロテアーゼ阻害因子であり、プラスミンやトリプシン様酵素などのプロテアーゼを阻害することで細胞外でのタンパク質分解（細胞外プロテオリシス）を調節します。マウスの組織では、TFPI-2 は細胞外マトリックス（ECM）の代謝回転、細胞周囲のプロテアーゼ活性、ならびに接着・遊走・組織リモデリングに影響する細胞—マトリックス相互作用の制御に関与します。凝固および線溶に関連するプロテオリティックカスケードを抑制し、さらにマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）駆動のリモデリングとも連関することで、TFPI-2 は血管および間質の恒常性維持に寄与します。TFPI-2 の発現や活性の変化は、マトリックス分解の制御異常や浸潤性の細胞表現型と関連しており、線維化、血管病変、がん研究において重要な意味を持ちます。

TFPI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTfpi2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tfpi2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tfpi2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TFPI-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TFPI-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tfpi2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TFPI-2の機能に不可欠なTfpi2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tfpi2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TFPI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびTFPI-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tfpi2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TFPI-2 HDRプラスミド（m）および TFPI-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTfpi2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTfpi2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。