TCF-19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404549

Panoramica

TCF19 (fattore di trascrizione 19) codifica TCF-19, una proteina nucleare legante il DNA, arricchita nelle cellule proliferanti e collegata a programmi di controllo trascrizionale che coordinano la progressione del ciclo cellulare. È stata associata alla regolazione di geni coinvolti nella replicazione del DNA e nell’ingresso in fase S, supportando vie che accoppiano la dinamica della cromatina ai segnali di crescita. Un’alterata espressione di TCF19 è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è inoltre implicata, da studi genetici e funzionali, in fenotipi immunitari e metabolici, inclusa la suscettibilità alle malattie autoimmuni. Queste connessioni rendono TCF-19 un bersaglio utile per analizzare reti trascrizionali che influenzano proliferazione, mantenimento del genoma e segnalazione infiammatoria.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TCF-19 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TCF19 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TCF19 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TCF19 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TCF-19.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TCF19 per lo studio della segnalazione di TCF-19, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TCF19 critici per la funzione di TCF-19
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TCF19 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TCF-19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TCF-19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TCF19. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TCF-19 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TCF-19 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TCF19 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TCF19 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.