Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
TANC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406741
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TANC Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico TANC, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TANC Antibody (H-8): sc-514679
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TANC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406741 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TANC1 codifica TANC, una proteina di impalcatura multidominio arricchita nelle sinapsi eccitatorie, dove supporta l’organizzazione della densità postsinaptica e l’assemblaggio di complessi di segnalazione. Attraverso le sue interazioni con i recettori sinaptici e i regolatori del citoscheletro, TANC contribuisce alla morfogenesi delle spine dendritiche, alla stabilità sinaptica e al rimodellamento dipendente dall’attività. Queste funzioni collocano TANC1 nei percorsi dello sviluppo neuronale e della plasticità sinaptica che influenzano la formazione dei circuiti e la segnalazione omeostatica. Un’alterata regolazione dell’impalcatura sinaptica e della connettività è stata collegata a meccanismi di malattie neuroevolutive e neuropsichiatriche, rendendo TANC1 un locus utile per studiare le relazioni genotipo-fenotipo in modelli neuronali.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TANC (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TANC1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TANC1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TANC1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TANC.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TANC1 per lo studio della segnalazione di TANC, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TANC1 critici per la funzione di TANC
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TANC1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal TANC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TANC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TANC1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal TANC Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TANC (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TANC1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TANC1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.