STC2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423183

Descripción general

Stc2 codifica la estaniocalcina 2 (STC2), una glucoproteína secretada implicada en la homeostasis del calcio y el fosfato y en la adaptación celular al estrés metabólico y del microambiente. En células de ratón, la expresión de STC2 está regulada por vías de señalización sensibles al estrés y se asocia comúnmente con el estrés del retículo endoplásmico y con programas de respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), lo que favorece la supervivencia en condiciones de hipoxia o limitación de nutrientes. STC2 se ha vinculado con la modulación de la señalización de factores de crecimiento, el equilibrio redox y la proteostasis, situándose como un nodo funcional en rutas que influyen en la proliferación y la diferenciación. Se han descrito alteraciones en la actividad de STC2 en diversos contextos relevantes para enfermedad, incluidos fenotipos asociados al cáncer, estrés inflamatorio y desregulación metabólica, lo que convierte a Stc2 en una diana útil para estudios mecanísticos en modelos de mamíferos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO STC2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stc2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stc2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stc2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STC2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stc2 para la investigación de la señalización de STC2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Stc2 críticos para la función de STC2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stc2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido STC2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido STC2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stc2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STC2 (m) y el plásmido HDR STC2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stc2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stc2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.