STAMBP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404726

개요

STAMBP는 JAMM 계열 탈유비퀴틴화 효소(AMSH)를 암호화하며, STAM 및 HGS 같은 ESCRT-0 구성요소에 결합해 엔도사이토시스로 유입된 화물(cargo)에 붙은 유비퀴틴 사슬을 편집합니다. 유비퀴틴 의존적 분류(sorting)를 조절함으로써 STAMBP는 수용체 하향조절, 엔도솜 수송, 리소좀 분해를 제어하는 데 기여하며, EGFR을 포함한 다양한 성장인자 수용체 경로에서의 신호 출력에 영향을 줍니다. STAMBP의 활성은 유비퀴틴 사슬 토폴로지와 초기 엔도솜에서의 화물 운명 결정(cargo fate decision)을 조절함으로써 단백질 항상성(proteostasis)과 세포 스트레스 반응에도 기여합니다. STAMBP 기능 이상은 신경발달 관련 표현형과 면역 조절 이상과 연관된 것으로 보고되어, 인간 세포에서 엔도솜–리소좀 경로 결함 및 유비퀴틴 신호전달을 연구하는 데 유용한 표적이 됩니다.

STAMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 STAMBP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 STAMBP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 STAMBP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 STAMBP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 STAMBP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 STAMBP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• STAMBP 기능에 중요한 STAMBP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 STAMBP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• STAMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 STAMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 STAMBP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  STAMBP HDR 플라스미드 (h) 및 STAMBP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 STAMBP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 STAMBP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.