SLC17A9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432833

Visão geral

Slc17a9 codifica a SLC17A9, um transportador vesicular de nucleotídeos (VNUT) que carrega ATP e outros nucleotídeos em vesículas secretórias, permitindo a sinalização purinérgica regulada. Ao controlar o conteúdo de ATP nas vesículas, a SLC17A9 influencia a comunicação dependente de exocitose que envolve as vias dos receptores P2X/P2Y e respostas a jusante ligadas a Ca²⁺ e MAPK em contextos neurais e imunológicos. Essa atividade de transporte sustenta processos como neurotransmissão, ativação microglial e liberação de mediadores inflamatórios, tornando Slc17a9 um ponto útil para estudar a comunicação cruzada neuroimune e a inflamação estéril. A desregulação do manejo vesicular de ATP e do tônus purinérgico tem sido implicada na sinalização da dor, na neuroinflamação e nas respostas a lesão tecidual, posicionando Slc17a9 como um alvo mecanisticamente relevante para investigação de vias em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC17A9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc17a9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc17a9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc17a9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC17A9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc17a9 para a investigação da sinalização de SLC17A9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc17a9 críticos para a função SLC17A9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc17a9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLC17A9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SLC17A9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc17a9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC17A9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SLC17A9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc17a9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc17a9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.