SERF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422894

Descripción general

Serf1 codifica el factor pequeño 1 rico en EDRK (SERF1), una proteína intrínsecamente desordenada y altamente conservada, implicada en la proteostasis y en procesos asociados al ARN. SERF1 se ha relacionado con la modulación de la dinámica de agregación de proteínas y con las respuestas celulares al estrés, con interacciones descritas que influyen en la función nucleolar y en el metabolismo del ARN. En sistemas murinos, Serf1 se estudia por sus contribuciones a la homeostasis neuronal y del desarrollo, donde las redes de proteostasis alteradas son relevantes para la neurodegeneración y otros fenotipos asociados al mal plegamiento de proteínas. Las perturbaciones de pérdida o ganancia de función de Serf1 respaldan estudios mecanísticos que conectan las vías de chaperonas, la organización de ribonucleoproteínas y las proteínas propensas a agregarse.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SERF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Serf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Serf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Serf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SERF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Serf1 para la investigación de la señalización de SERF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Serf1 críticos para la función de SERF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Serf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SERF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SERF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Serf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SERF1 (m) y el plásmido HDR SERF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Serf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Serf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.