RGS17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425225

概要

Rgs17は、Gタンパク質シグナル伝達の調節因子17（RGS17）をコードしており、GPCRによるシグナル伝達を終結させるためにGαサブユニット上でのGTP加水分解を促進するRGSファミリーの一員です。ヘテロ三量体Gタンパク質の活性を抑えることで、RGS17はcAMP/PKAシグナル伝達、下流のキナーゼカスケード、ならびに神経細胞間コミュニケーションや分泌細胞応答に関連する転写プログラムに影響を与えます。マウス系では、Rgs17発現の変化が神経行動学的表現型の変化や、腫瘍生物学および転移モデルで一般に解析されるシグナル伝達ネットワークの破綻と関連することが報告されています。これらの特性により、RGS17はGPCRシグナルの振幅、経路間クロストーク、そして状況依存的な転写出力を研究するうえで有用な結節点となります。

RGS17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRgs17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rgs17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rgs17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RGS17タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RGS17シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rgs17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RGS17の機能に不可欠なRgs17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rgs17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RGS17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRGS17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rgs17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RGS17 HDRプラスミド（m）および RGS17 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRgs17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRgs17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。