Raftlin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414360

概要

RFTN2は、免疫受容体シグナル伝達に関与する膜マイクロドメインの構築を助ける、脂質ラフト関連のスキャフォールドタンパク質であるRaftlin-2をコードしています。Raftlin-2はリンパ系細胞においてシグナル伝達複合体の輸送と安定化を支え、B細胞受容体（BCR）近傍での初期イベント、下流のキナーゼカスケード、ならびに制御されたエンドサイトーシスに寄与します。脂質ラフト依存的なシグナル伝達を協調的に制御する役割を通じて、RFTN2は免疫細胞活性化、抗原応答性、炎症性経路の調節に関する研究で重要です。発現量や機能の変化は、自己免疫や血液疾患の生物学に関連する状況を含む免疫調節異常の機序研究において関心の対象となっています。

Raftlin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRFTN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RFTN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RFTN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Raftlin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Raftlin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RFTN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Raftlin-2の機能に不可欠なRFTN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RFTN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Raftlin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRaftlin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RFTN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Raftlin-2 HDRプラスミド（h）および Raftlin-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRFTN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRFTN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。