PRMT7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431946

概要

Prmt7はPRMT7をコードしており、PRMT7はタイプIIIのタンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼです。PRMT7はヒストンおよび非ヒストン基質のアルギニン残基に対して対称性ジメチル化を触媒し、その結果としてクロマチン構造や転写プログラムの形成に関与します。PRMT7の活性は、エピジェネティック制御、RNAプロセシング、ストレス適応シグナル伝達と交差し、哺乳類における系譜の決定や細胞アイデンティティの維持に影響を及ぼします。マウスモデルでは、Prmt7はクロマチンアクセシビリティおよび遺伝子発現ネットワークの調節を介して、筋幹細胞機能、神経発生、免疫関連の転写応答の制御に関与することが示されています。PRMT7依存的メチル化の破綻は、分化状態の変化や発生・代謝性疾患に関連する表現型と結び付けられており、エピジェネティック制御の機序研究における有用な結節点となります。

PRMT7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPrmt7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Prmt7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Prmt7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRMT7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRMT7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Prmt7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRMT7の機能に不可欠なPrmt7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Prmt7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRMT7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPRMT7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Prmt7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRMT7 HDRプラスミド（m）および PRMT7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPrmt7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPrmt7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。