Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PPOX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422376
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PPOX El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PPOX, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PPOX Anticuerpo (C-12): sc-271768
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PPOX Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422376 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Ppox** codifica la **protoporfirinógeno oxidasa (PPOX)**, una enzima de la **membrana interna mitocondrial** que cataliza la oxidación del **protoporfirinógeno IX** a **protoporfirina IX** en las etapas terminales de la biosíntesis del hemo. Al controlar el flujo a través de la vía de las porfirinas, PPOX favorece la producción de hemoproteínas necesarias para la fosforilación oxidativa, la función de los citocromos y la homeostasis redox celular. La alteración de la actividad de PPOX puede perturbar el metabolismo mitocondrial y elevar los intermediarios porfirínicos, lo que vincula este nodo del metabolismo del hemo con porfirias asociadas a fotosensibilidad y fenotipos más amplios de estrés oxidativo. Por ello, **Ppox** es relevante para estudiar la bioenergética mitocondrial, los programas de diferenciación eritroide y el diálogo metabólico entre la disponibilidad de hemo y el manejo de las especies reactivas de oxígeno.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PPOX (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ppox en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ppox junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ppox tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PPOX.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ppox para la investigación de la señalización de PPOX, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ppox críticos para la función de PPOX
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ppox para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PPOX CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PPOX CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ppox. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PPOX (m) y el plásmido HDR PPOX (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ppox para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ppox definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.