Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401476
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP1γ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP1γ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PP1γ Anticorpo (E-4): sc-515943
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401476 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PPP1CC codifica a proteína fosfatase 1 gama (PP1γ), uma fosfatase catalítica de serina/treonina que se associa a diversas subunidades regulatórias para desfosforilar substratos-chave e controlar a especificidade e a localização do substrato. A PP1γ contribui para importantes redes de sinalização e de controle do ciclo celular ao regular estados de fosforilação envolvidos na progressão mitótica, na segregação cromossômica e na dinâmica do citoesqueleto, além de estar implicada no processamento de RNA e em respostas ao estresse celular. Por meio dessas funções, a PP1γ influencia vias que governam proliferação, diferenciação e estabilidade do genoma, tornando o PPP1CC um nó relevante para o estudo de circuitos regulatórios dirigidos por fosforilação. A atividade de PP1 desregulada tem sido associada à sinalização oncogênica, a mecanismos relacionados à neurobiologia e a outros processos patológicos dependentes de fosforilação, apoiando investigações mecanísticas em modelos celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP1γ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PPP1CC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PPP1CC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PPP1CC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP1γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PPP1CC para a investigação da sinalização de PP1γ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PPP1CC críticos para a função PP1γ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PPP1CC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PPP1CC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP1γ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PP1γ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PPP1CC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PPP1CC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.