Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Phocein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418293
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Phocein O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Phocein, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Phocein Anticorpo (D-5): sc-137229
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Phocein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418293 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MOB4 codifica a proteína humana phocein, um componente estrutural (scaffold) conservado, implicado na regulação da sinalização da via Hippo por meio de sua associação com complexos ligados a STRIPAK/PP2A e redes relacionadas de quinases de serina/treonina. A phocein contribui para a coordenação da polaridade celular, da organização do citoesqueleto e de processos de tráfego vesicular que influenciam a proliferação e a migração. Por meio desses hubs de sinalização, MOB4 tem sido associado ao controle do crescimento tecidual e a nós de sinalização responsivos ao estresse, frequentemente alterados em vias relacionadas ao câncer. A elucidação da função da phocein dá suporte a estudos mecanísticos de crosstalk entre vias que afetam a atividade de YAP/TAZ, a dinâmica de fosforilação e decisões de destino celular dependentes do contexto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Phocein (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MOB4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MOB4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MOB4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Phocein.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MOB4 para a investigação da sinalização de Phocein, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MOB4 críticos para a função Phocein
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MOB4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Phocein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Phocein Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MOB4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Phocein Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Phocein (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MOB4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MOB4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.