PDLIM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405340
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDLIM5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PDLIM5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDLIM5 Anticorpo (G-2): sc-515621
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDLIM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405340 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PDLIM5 codifica uma proteína de ancoragem com domínios PDZ-LIM que se localiza em estruturas ricas em actina e conecta a arquitetura do citoesqueleto a complexos de sinalização em adesões focais e ao longo de fibras de estresse. Por meio de interações com quinases e parceiros associados à actina, PDLIM5 contribui para a mecanotransdução, a adesão e migração celular e a organização de elementos contráteis que influenciam a morfologia celular e a transmissão de força. Em tecidos excitáveis, PDLIM5 tem sido associada à regulação da sinalização citoesquelética neuronal e cardíaca e à remodelação sináptica ou contrátil. Alterações na expressão de PDLIM5 ou variações genéticas têm sido relatadas em estudos sobre fenótipos neuropsiquiátricos e patologia cardíaca, sustentando sua relevância para investigar redes de sinalização acopladas ao citoesqueleto em modelos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PDLIM5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDLIM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDLIM5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDLIM5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PDLIM5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDLIM5 para a investigação da sinalização de PDLIM5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDLIM5 críticos para a função PDLIM5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDLIM5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PDLIM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PDLIM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDLIM5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PDLIM5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PDLIM5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDLIM5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDLIM5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.