PAP-α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403906

개요

PAPOLA는 폴리(A) 중합효소 알파(poly(A) polymerase alpha, PAP-α)를 암호화하며, 이는 폴리아데닐화(polyadenylation) 부위에서 절단된 뒤 pre-mRNA에 폴리(A) 꼬리를 첨가하는 mRNA 3′ 말단 처리 기구의 핵심 촉매 구성요소입니다. PAP-α는 폴리(A) 꼬리 길이를 조절하고 절단 및 폴리아데닐화 특이성 인자들과 결합함으로써 mRNA의 안정성, 핵외 수출, 번역 효율에 영향을 미치며, 결과적으로 전반적인 유전자 발현 프로그램을 형성합니다. PAPOLA 의존적 대체 폴리아데닐화는 전사체 아이소폼 다양성에 기여하고, 증식과 분화 과정에서 전사 후 조절을 재구성할 수 있습니다. 3′ 말단 처리 및 폴리아데닐화 패턴의 이상은 암 생물학을 비롯한 유전자 발현 조절 장애와 연관되어 있어, PAP-α는 RNA 대사 기전 연구에 유용한 표적(노드)입니다.

PAP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PAPOLA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PAPOLA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PAPOLA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAP-α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAP-α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PAPOLA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAP-α 기능에 중요한 PAPOLA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PAPOLA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PAP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PAPOLA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAP-α HDR 플라스미드 (h) 및 PAP-α HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PAPOLA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PAPOLA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.