Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405925

概要

PANX2は、細胞膜でチャネルを形成するタンパク質であるパネキシン2をコードしており、ATPやその他の小分子を放出してオートクリン／パラクリンシグナル伝達の調整に関与します。パネキシン2は、細胞内カルシウム動態、インフラマソーム関連応答、ニューロン‐グリア間コミュニケーションに影響を及ぼすプリン作動性シグナル伝達ネットワークに寄与し、チャネル活性を細胞ストレスや自然免疫の調節と結び付けます。発現は神経系で豊富であり、神経炎症、興奮毒性による障害、腫瘍細胞の挙動変化といった文脈で研究されてきました。これらの場面では、細胞外ヌクレオチドシグナルが増殖や微小環境のシグナルを再編成し得ます。こうした特性によりPANX2は、膜チャネルが代謝ストレスを炎症およびシナプス関連経路とどのように統合するかを解明するための有用な標的となります。

Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPANX2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PANX2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PANX2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Pannexin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Pannexin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PANX2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Pannexin-2の機能に不可欠なPANX2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PANX2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPannexin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PANX2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Pannexin-2 HDRプラスミド（h）および Pannexin-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPANX2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPANX2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。