NPR-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421949

概要

マウスのNpr3は、ナトリウム利尿ペプチド受容体C（NPR-C）をコードしており、ANP、BNP、CNPに結合してそれらの利用可能性および下流シグナル伝達を調節する膜受容体である。NPR-Cは、リガンドの代謝回転を制御することでナトリウム利尿ペプチドにより駆動されるcGMPシグナルを調節し、血管緊張、心臓リモデリング、腎でのナトリウム取り扱い、体液恒常性に影響を与えるクリアランス受容体として広く特徴づけられている。ペプチドのクリアランスにとどまらず、NPR-Cは複数の細胞種においてGi/アデニル酸シクラーゼ関連シグナル伝達や受容体介在性エンドサイトーシスとも関連づけられている。NPR-Cを介する経路の制御異常は心代謝・心血管系の表現型と関連することが報告されており、Npr3は血圧調節や組織リモデリングの機序研究に有用な標的となる。

NPR-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNpr3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Npr3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Npr3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPR-Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPR-Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Npr3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPR-Cの機能に不可欠なNpr3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Npr3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPR-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNPR-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Npr3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPR-C HDRプラスミド（m）および NPR-C HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNpr3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNpr3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。